Fenilgalaktozid CAS: 2818-58-8

Ferment faolligiga ta'siri: Fenilgalaktozid odatda β-galaktozidaza fermentining faolligini o'lchash uchun ishlatiladi. Fenilgalaktozid β-galaktozidaza tomonidan gidrolizlanganda, u p-nitrofenolni ajratadi. p-nitrofenolning to'planishi miqdoriy jihatdan o'lchanishi mumkin, bu esa β-galaktozidaza faolligi haqida ma'lumot beradi. Bu ta'sir ferment tahlillari va skrining tizimlari kabi qo'llanmalarda qo'llaniladi.

Gen ekspressiyasi tahlili: Fenilgalaktozid ko'pincha gen ekspressiyasini o'rganish uchun molekulyar biologiya tajribalarida substrat sifatida ishlatiladi. β-galaktozidazani kodlaydigan lacZ geni odatda boshqa qiziqish uyg'otadigan genlarning tartibga soluvchi ketma-ketliklari bilan birlashadi. lacZ genining ekspressiyasi va β-galaktozidaza tomonidan fenilgalaktozidning gidrolizi o'rganilayotgan maqsadli genning ekspressiya shakli va darajasini ko'rsatishi mumkin.

Skrining tizimlari: Fenilgalaktozid β-galaktozidaza faolligidan foydalanadigan skrining tizimlarining muhim tarkibiy qismidir. Keng tarqalgan misollardan biri molekulyar biologiya tajribalarida rekombinant yoki transformatsiyalangan hujayralarni aniqlash uchun ishlatiladigan ko'k-oq skrining usulidir. Rekombinant DNKni muvaffaqiyatli qabul qilgan yoki genetik rekombinatsiyadan o'tgan koloniyalar β-galaktozidazani ifodalaydi, bu esa fenilgalaktozidning gidroliziga va ko'k rang hosil bo'lishiga olib keladi.

Oqsilni tozalash: Ba'zi hollarda, fenilgalaktozid β-galaktozidaza bilan maxsus bog'lanadigan yoki faollashtiriladigan oqsillarni tozalash uchun affinlik xromatografiyasi uchun ligand sifatida ishlatilishi mumkin. Qiziqarli oqsil affinlik yorlig'iga yoki β-galaktozidaza bilan bog'lanish domenini o'z ichiga olgan birikish yorlig'iga ega bo'lishi mumkin. Oqsil aralashmasini immobilizatsiya qilingan fenilgalaktozidli ustun orqali o'tkazish orqali kerakli oqsil tanlab saqlanishi va keyinchalik elyutlanishi mumkin.