4-Nitrofenil beta-D-galaktopiranozid CAS: 200422-18-0

Ta'siri: ONPG - bu b-galaktosidaza fermentining mavjudligi va faolligini aniqlash uchun maxsus ishlatiladigan substrat.b-galaktosidaza fermenti mavjud va faol bo'lganda, u ONPGni ikkita mahsulotga ajratadi: o-nitrofenol va galaktoza hosilasi.O-nitrofenolning ajralib chiqishi sariq rang o'zgarishiga olib keladi, uni spektrofotometr yordamida o'lchash mumkin.

Ilova: ONPG molekulyar biologiya va biokimyo tadqiqotlarida bir nechta ilovalarga ega:

b-galaktosidaza faolligini aniqlash: ONPG odatda b-galaktosidaza fermenti faolligini o'lchash va miqdorini aniqlash uchun ishlatiladi.Ferment faolligiga to'g'ridan-to'g'ri proportsional bo'lgan o-nitrofenol hosil bo'lish tezligini spektrofotometrik tarzda o'lchash mumkin.

Genni ifodalash va tartibga solish: ONPG ko'pincha genlarni ifodalash va tartibga solish bo'yicha tadqiqotlar bilan bog'liq tajribalarda qo'llaniladi.U tez-tez ishlatiladigan lacZ termoyadroviy tizimi kabi termoyadroviy protein tahlillarida, maxsus promotorlar nazorati ostida genlarning ifodasini o'rganish uchun ishlatiladi.ONPG yordamida o'lchangan beta-galaktosidaza faolligi genlarni ifodalash darajasi haqida tushuncha beradi.

b-galaktosidaza faolligi uchun skrining: ONPG rekombinant DNK texnologiyasida b-galaktosidazani kodlaydigan LacZ genining mavjudligi va funksionalligini aniqlash uchun kolorimetrik skrining usuli sifatida ishlatilishi mumkin.Ushbu skrining usuli qiziqish genini o'z ichiga olgan klonlarni aniqlashga yordam beradi.

Fermentlar kinetikasini o'rganish: ONPG b-galaktosidaza fermenti kinetikasini o'rganishda ham foydalidir.Turli xil substrat konsentrasiyalarida ferment-substrat reaktsiyasining tezligini o'lchash orqali Michaelis-Menten konstantalari (Km) va maksimal reaktsiya tezligi (Vmax) kabi kinetik parametrlarni aniqlash mumkin.